Replacement (대체법 사용)
동물실험을 실시하고자 하는 때에는 이를 대체할 수 있는 방법을 우선적으로 고려하여야 한다.

Reduction (동물수 최소화)
동물실험은 실험에 사용하는 동물(이하 “실험동물”이라 한다)의 윤리적 취급과 과학적 사용에 관한 지식과 경험을 보유한 자가 시행하여야 하며, 필요한 최소한의 동물을 사용하여야 한다.

Refinement (고통 최소화)
실험동물의 고통이 수반되는 실험은 감각 능력이 낮은 동물을 사용하고, 진통, 진정, 마취제의 사용 등 수의학적 방법에 따라 고통을 덜어주기 위한 적절한 조치를 취하여야 한다.

Relevance (타당성)
동물을 사용하는 연구계획은 중요한 과학적, 의학적 또는 사회적 의미를 지니는 문제에 대한 해결책을 제시해 줄 수 있어야 하며, 동물실험을 통해서 인간과 동물에게 주어지는 이익이 동물에게 가해지는 모든 위험과 피해보다 커야 한다.

Redundancy avoidance (중복실험방지)
동물실험에서 중복 실험을 피하고 문헌 조사를 철저히 하여 유사한 실험이 수행되었는지의 여부를 확인해야 한다.